2.3 气相色谱法（GC）
气相色谱法具有进样量少，高敏感性，高选择性，高特异性等突出优点，但在测定大豆黄素和金雀异黄素时需制备衍生物，样品制备步骤较多，耗时长且仪器较为昂贵，从而限制了该法的推广应用。
Jason Liggins等采用毛细管气-质联用测定了80余种蔬菜和坚果中的大豆黄素和金雀异黄素，其中36种含有被测物质，而大豆中大豆黄素和金雀异黄
G.E.Joannou等采用毛细管气相色谱法和气-质联用分离测定了尿样中的大豆黄素和金雀异黄素。测定条件为：Hewlett Packard 5710A色谱仪；30mSE30×0.25柱；氮气流速1mL·min-1；检测器温度为300℃；柱温为197～260℃。Lee-Jane W.Lu等采用气相色谱法测定了尿样中的大豆黄素和金雀异黄素，考察了长期服用豆类食品的健康男性尿中大豆黄素和金雀异黄素的经进代谢情况。测定条件为：Hewlett Packard 5290色谱仪；离子火焰检测器；HP-1气相柱；进样温度275℃；检测温度350℃；超始炉温85℃，以30℃·min-1速度增温至275℃；氢气流速20mL·min-1。Herman Adlercreutz等以氘化金雀异黄素为内标采用同位素稀释气-质联用对芬兰和日本妇女血浆中的木质素和异黄酮（包括大豆黄素和金雀异黄素）等7种化合物进行了含量测定。气-质联用条件为：BP-1（SGE）固定相石英玻璃柱；载气为氨气；离子源、检测器温度为250℃；超始炉温100℃持续1min，而后以30℃min-1增至280℃。Jason Liggins等以合成的大豆葡萄糖苷和金雀异黄素在较宽浓度范围内进行含量测定。该血样采自服用富含大豆黄素、金雀异黄素食物的人群。Hadelercveutz等采用Hewlett Packard5995B型气相色谱-质谱仪对雌性猩猩尿样中的大豆黄素、金雀异黄素进行了检测。气相柱为12.5m长的OV-101石英玻璃毛细管柱。
2.4 毛细管电泳法（CE）
毛细管电泳法具有速度快、选择性高、分离效率高、经济及样品前处理简单等优点，已逐渐成为测定植物雌激素（尤其是大豆苷元和金雀异黄素）的常规方法之一。
VanttinenK等采用毛细管电泳法对处理过的豆粉和tofu中大豆黄素和金雀异黄毒汁是行了测定。系统采用开口毛细管柱；进样压150mbar.s；分离电势10KV；清洗真空压2kpa；相应电流60uA；柱温25℃；进样前用1mol·L-1NaOH和水分别冲洗毛细管柱1min，缓冲液灌注3min；全部洗脱时间30min；紫外检测器分地254，268，400nm波长处检测大豆黄素、金雀异黄素和内标ρ-nitrophenol。George Smcleod等采用毛细管电泳法对食物中大豆黄素和金雀异黄素的电离常数进行了测定。系统采用石英玻璃毛细管柱；单波长紫外检测器，检测波长为210nm；两样品测定间用1 mL·min-1NaOH洗脱5min，去离子水洗脱3min，测试用电解质洗脱5min。M.A.Aramendia等将P/ACF5500毛细管电泳仪和电喷质谱联用，对异黄酮类物质进行了分离测定。系统采用开口石英玻璃毛细管柱；P/ACE二极管阵列检测器，检测波长为260nm；进样前用100mmol·L-1NaOH，Milli-Q-纯化水和电解质分别冲洗毛细管柱；低压0.5bar进样，正极电压30KV。Z.K.Shihabi等采用毛细管电泳法对大豆及其他植物提取物中的大豆黄素和金雀异黄素异黄酮成分进行了分析测定。系统采用毛细管柱；进样前用1 moL·L-1NaOH冲洗毛细管柱1min，用200mmol·L-1醋酸缓冲液浸泡1min；电压13KV。
3.免疫检测法
3.1 时间分辨荧光免疫分析法（TR-FIA）
荧光免疫分析中的时间分辨测量技术，是为了提高免疫分析法灵敏度和特异性而发展起来的，测定中根据标记物和干扰物荧光寿命的差异，选择性的测定标记物的荧光信号即为所谓的时间分辨测量技术。
Mariko Uehara等通过TR-FIA法对人尿样中的植物雌激素（包括大豆黄素和金雀异黄酮）进行了快速分析。并采用该法对人群尿样进行了广泛的测定，从而评价了西方疾病的发病率与尿中植物雌激素水平之间可能存在的相关性。该法采用铕对植物雌激素进行标记，在合成大豆黄素和金雀异黄素的4’-O-羧甲基纤维素衍生物后，分别将这些衍生物与牛血清蛋白进行偶联，作为抗原对家兔进行免疫，同时将这些衍生物进行标记示踪。酶解后用Vittor1420多标记计数仪进行TR-FIA测定，此法对浓度小于5nmol·L-1的植物雌激素非常敏感，与GC-MS测定值，且测定结果与GC-MS结果有显著的相关性，说明该法是定量测定人群尿样中的植物雌激素的一种较适宜的方法。Guojie J Wang等通过TR-FIA法对人尿样中的植物雌激素（包括大豆黄素和金雀异黄素）进行了测定。该法采用二氯化铕作为标记物在合成大豆黄素和金雀异黄素的4’-O-羧甲基纤维素衍生物后与牛血清蛋白进行偶联对家兔进行免疫，同时将这些衍生物进行标记示踪，酶解，用乙醚提取后用Vittor1420多标记计数仪进行TR-FIA测定，可与一些异黄酮发生一定程度上的抗体交叉反应，但与黄酮不发生抗体交叉反应，交叉反应不影响结果，对复合物有很高的特异性，TR-FIA法与同位素稀释的GC-MS的相关系数很高，r为0.95～0.99。
3.2 酶联免疫吸附法（ELISA）
经典酶联免疫分析法是一种基本的免疫测定方法，其主要的实验步骤可概括为包被、洗涤、与特异性抗体反应、与酶抗抗体体反应、显色和测定。
Paul Creeke等采用ELISA法对人血浆中的大豆黄素和其代谢物equol进行了测定，大豆黄素和equol的分析缓冲液检测限分别为21pg/孔、70pg/孔。
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